Определение резус-фактора крови: как узнать его экспресс-методом

Содержание
  1. Определение резус-фактора крови: как узнать его экспресс-методом – Про осуды
  2. Стандартная методика определения группы крови
  3. Проведение исследования
  4. Метод с использованием цоликлонов
  5. Быстрый способ «Эритротест»
  6. Классификация по системе АВО
  7. Определение группы крови: цоликлоны, стандартные сыворотки и перекрестный способ
  8. Алгоритм и порядок определения группы крови
  9.  Расшифровка результатов определения группы крови
  10. Определение резус-фактора цоликлоном Анти-D
  11. Оценка результатов определение группы крови стандартными сыворотками
  12. Определение резус-фактора
  13. Определение резус-фактора экспресс-методом
  14. Определение резус-фактора желатиновым экспресс-методом
  15. 1. Консервирование, хранение, транспортировка и макроскопическая оценка годности крови
  16. Определение группы крови: цоликлоны, стандартные сыворотки и перекрестный способ
  17. Методика проведения реакции со стандартными эритроцитами
  18. Оценка результатов проведения реакции со стандартными эритроцитами
  19. Как узнать резус-фактор крови?
  20. Когда сдают анализ на Rh
  21. Как определяют
  22. На чашках Петри
  23. Определение Rh-принадлежности цоликлонами
  24. Экспресс-метод
  25. С применением желатина
  26. Заключение
  27. Определение резус фактора крови: алгоритм как определить, таблица
  28. Что такое резус фактор
  29. Особенности подготовки
  30. Способы определения
  31. Чашки Петри
  32. Цоликлоны
  33. Желатин
  34. Расшифровка результатов

Определение резус-фактора крови: как узнать его экспресс-методом – Про осуды

Определение резус-фактора крови: как узнать его экспресс-методом

Практически каждый человек хотя бы единожды за свою жизнь проходил тест для установления принадлежности группы крови. О методах проведения данного анализа и об их достоверности пойдет речь далее.

Для чего проводится диагностика?

Группа крови – это определенный ряд антигенов, размещенных на поверхности эритроцитов, которые и определяют их специфичность. Таких антигенов известно очень много, поэтому принято единую классификацию крови по АВО и резус-фактору.

Этот показатель в обязательном порядке определяется у пациентов перед хирургической операцией, военным, полицейским и другим категориям людей, которые могут потребовать срочного переливания крови.

Стандартная методика определения группы крови

Самый распространенный метод исследования данного показателя – это способ с применением стандартной сыворотки. Эта диагностика определяет общепринятые антигены по системе АВО.

Изогеммагглютинирующая сыворотка представляет собой совокупность специальных антител к наружным частичкам эритроцитов.

Если находится совместимый антиген, на который могут воздействовать антитела, то формируется комплекс, способствующий началу иммунно-защитного механизма.

[attention type=yellow]

Вследствие этого происходит склеивание эритроцитарных клеток крови (агглютинация). Если подобное происходит, то делается вывод о несовместимости крови.

[/attention]

Данные сыворотки изготавливаются из крови доноров по специальной системе, подразумевающая под собой извлечение плазмы, в которой и содержать антитела, после чего ее разводят изотоником – хлорид натрия, это проходит в несколько этапов:

  • В емкость наливают 1 мл воды, в которой растворено 0,9% обычной соли.
  • В эту же пробирку вносят такое же количество разведенной плазмы.
  • Затем 1 мл данной жидкости вносят в емкость с изотоником.

Процесс позволяет получить соотношение 1:256. Если методика разведения будет нарушена, то есть большая вероятность получения ошибочных результатов.

Проведение исследования

На поверхность планшета наносится 0,1 мл каждой сыворотки в район, где нанесена нужная пометка. За тем берется исследуемая кровь объемом 0,01 мл для каждого образца. И затем проводится смешивание каждой капли сыворотки с кровью.

Спустя пять минут проводят диагностику. Тестирование считается положительным, если прошла реакция агглютинации. Исходя из результатов анализов, выполняется построение таблицы, в которую они и заносятся.

  • Таблица результатов теста на группу крови с применением стандартных сывороток.
  • Методика перекрестных реакций

В этом случае, чтобы определить агглютиноген используют цоликлоны. Иначе стандартные сыворотки с технологией параллельного выяснения благодаря эталонным эритроцитарным клеткам.

Два этих способа весьма сходны между собой. Но различия все, же есть.

На поверхность, на которую предварительно помещаются различные сыворотки, наносят по небольшой капле обычных эритроцитов. Затем кровь разделяют на фракции при помощи центрифуги. И форменные элементы добавляют к стандартным сывороткам, а плазменную часть – к стандартным эритроцитарным клеткам. Оценивание результатов проводят через пять минут и показатели отмечают в таблице.

Благодаря данной методике исключаются ошибки при исследовании.

Метод с использованием цоликлонов

  1. Если нет возможности определить группу крови стандартными сыворотками, то используют данную методику.
  2. Цоликлоны – гибридные антитела, которые получают из в-лимфоцитов крови мышей.
  3. Последовательность проведения диагностики такая:
  1. После нанесения отметок на планшет, которые соответствуют виду цоликлона, наносится раствор.
  2. К каждому образцу цоликлона вносят одну каплю диагностированной крови.
  3. Оценка результатов через пять минут.
  4. Для данной методики необходимо соблюдать специальные условия. Они включают в себя пригодность цоликлонов, температуру в помещении и уровень влажности.

Результаты анализов считаются позитивными в том случае, когда при смешивании данных фракций наблюдается реакция агглютинации.

Если подобное произошло в двух образцах, то считается, что кровь относится к четвертой группе. Если реакция не наблюдается вовсе, то к первой. Диагностические ошибки в данной методике встречаются не часто.

Быстрый способ «Эритротест»

Выше перечисленные способы используются в медицине уже долгое время и распространены по всему миру. Но ввиду того, что отрасль постоянно развивается, вводятся быстрые диагностические методы по установлению принадлежности к группе крови. Таким нововведением считается и «Эритротест».

Чтобы определить показатель данным способом необходимо иметь следующее оборудование:

  • Стандартный планшет с пятью лунками
  • Скарификатор для прокола и получения биологической жидкости
  • Стеклянная пипетка с резиновой грушей
  • Пипетка для забора реактивов
  • Палочки для смешивания компонентов

Основное преимущество эритротеста состоит в том, что исследование не требует дополнительных условий и доступно в тот момент, когда проведение стандартной диагностики невозможно. Последовательность проведения

В углублениях планшета размещают цоликлоны к антигенам поверхностного типа и основному, который отвечает за наследственную передачу резус-фактора. В последнюю лунку добавляют контрольную сыворотку, которая исключит ошибочный результат и верно укажет на принадлежность к той или иной группе.

  • Оценивание результатов анализа проводится с помощью таблицы, в ней указываются возможные результаты тестирования.

Классификация по системе АВО

Группа крови, определение ее проводится исходя из специально разработанных норм. Существует определенная таблица, которая характеризует каждую группу крови.

ГруппыОписание
I (0)Эритроцитарные антигенные качества не наблюдаются
II (А)Присутствие антигена А
III (В)Наличие на поверхности эритроцитарных клеток антигена В
IV (АВ)Присутствие обоих антигенов

: Методы определения групп крови:

Источник:

Определение группы крови: цоликлоны, стандартные сыворотки и перекрестный способ

Определение группы крови и резус-фактора делятся на два способа:

Экспресс-диагностика (первичное определение группы крови и Rh-фактора) не учитывает антигены Келл, не говоря уже про другие системы верификации. Поэтому цоликлоны применяют только для первичного определения группы крови и резус-фактора и при экстренных показаниях трансфузии компонентов крови.

Подробнее о самой редкой группе крови в Мире можно найти здесь.

Определение группы крови и резус-фактора цоликлонами анти-А, анти-В и Анти-D супер является наиболее современным и относительно простым методом. Для определения группы крови используются цоликлоны, т.е. моноклональные антитела.

  • Что требуется для определения группы крови и резус-фактора?
  • цоликлон анти-А;
  • цоликлон анти-В;
  • цоликлон анти-D;
  • – раствор натрия хлорида 0,9 %; специальный планшет; стерильные палочки.

Алгоритм и порядок определения группы крови

Нанести цоликлоны анти-А, анти-В на специальный планшет по одной большой капле (0,1 мл), под соответствующими надписями.

Рядом с ними капнуть исследуемую кровь (0,01–0,03 мл) по одной маленькой капле. Перемешать их и наблюдать за наступлением или отсутствием реакции агглютинации в течение 3 мин. При сомнительном результате добавить 1 каплю 0,9% физиологического раствора.

 Расшифровка результатов определения группы крови

  • если реакция агглютинации наступила с анти-А цоликлоном, то исследуемая кровь относится к группе А (II);
  • если реакция агглютинации наступила с анти-B цоликлоном, то исследуемая кровь относится к группе B (III);
  • если реакция агглютинации не наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе 0 (I);
  • если реакция агглютинации наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе AB (IV), как показано на рисунке.

AB (IV)

Определение резус-фактора цоликлоном Анти-D

На планшете смешивают большую каплю (0,1 мл) анти-D цоликлона и маленькую каплю (0,01 мл) исследуемой крови пациента. За наступлением реакции агглютинации или её отсутствием наблюдают в течение 3 мин.

  • если реакция агглютинации наступила с цоликлоном анти-D , то исследуемая кровь относится к резус-положительной (Rh+)
  • если реакция агглютинации не наступила с цоликлоном анти-D, то исследуемая кровь относится к резус-отрицательной (Rh—)

AB (IV)Rh-

Другими словами, при смешивании цоликлона Анти-D с резус-положительными эритроцитами наступает реакция агглютинации, а если кровь резус-отрицательная — агглютинация отсутствует (как показано на рисунке — четвертая группа крови резус-отрицательная).

Определение групп крови стандартными изогемагглютинирующими сыворотками — поиск и обнаружение в крови антигенов А и В с помощью реакции агглютинации. Для достижения цели используют:

  • Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки групп крови О (I) — бесцветная, А (II) — синяя, В (III) — красная, АВ (IV) — жёлтая.
  • Белые тарелки, маркированные группами крови: 0 (I), А (II), В (III), AB (IV).
  • NaCl 0,9%
  • Стеклянные палочки
  1. Подписать тарелку (Ф.И.О. пациента);
  2. Нанести обозначения двух серий стандартных сывороток I, II и III групп крови в объёме 0,1 мл, образующие два ряда по три капли слева направо: 0 (I), А (II), В (III);
  3. Забрать кровь из вены. Шесть капель исследуемой крови пациента перенести стеклянной палочкой на пластину в шесть точек рядом с каплей стандартной сыворотки и перемешать.

Агглютинация начнется через 30 сек. В те капли, где произошла агглютинация, добавить по одной капле NaCl 0,9% и оценить результат.

Оценка результатов определение группы крови стандартными сыворотками

Положительная реакция агглютинации может быть пескообразной или лепестковой. При отрицательной реакции капля остаётся равномерно окрашенной в красный цвет. Результаты реакций в каплях с сыворотками одной и той же группы (двух серий) должны совпадать.

Принадлежность исследуемой крови к соответствующей группе определяют по наличию или отсутствию агглютинации при реакции с соответствующими сыворотками после наблюдения в течение 5 мин.

При этом следует отметить, что если сыворотки всех трёх групп дали положительную реакцию, это указывает на то, что испытуемая кровь содержит оба агглютиногена (А и В) и принадлежит к группе AB (IV).

Однако в таких случаях для исключения неспецифической реакции агглютинации необходимо провести дополнительное контрольное исследование испытуемой крови со стандартной изогемагглютинирующей сывороткой группы AB (IV), не содержащей агглютининов. Лишь отсутствие агглютинации в этой капле при наличии агглютинации в каплях, содержащих стандартные сыворотки групп 0 (I), А (II) и В (III), позволяет считать реакцию специфической и отнести исследуемую кровь к группе АВ (IV).

Определение группы крови перекрестным способом — обнаружение наличия или отсутствия в исследуемой крови антигенов А и В с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток, а также антител α и β с помощью стандартных эритроцитов. Реакцию со стандартными сыворотками проводят описанным выше способом.

Источник: https://med-lk.ru/krov-i-krovotecheniya/opredelenie-rezus-faktora-krovi-kak-uznat-ego-ekspress-metodom.html

Определение резус-фактора

Определение резус-фактора крови: как узнать его экспресс-методом

Определение резус-фактора методомконглютинации

Существует несколько методов определенияRh-фактора. Наиболее распространен методконглютинации на чашках Петри.

Для этогоисследования, кроме глазных пипеток ифлакона с изотоническим растворомхлорида натрия, необходимо иметь чашкиПетри, водяную баню с постояннойтемпературой 46—48оС и стандартныеан-тирезусные сыворотки всех группсистемы АВО.

Для анализа берут антирезуснуюсыворотку двух серий, одногруппную посистеме АВО с исследуемыми эритроцитами.В чашку Петри наносят по 2 каплиантирезусной сыворотки, слева — однойсерии, справа — другой в 3 ряда для 3исследований.

В каждую серию прибавляютпо капле эритроцитов (исследуемые,контрольные Rh-положительные и контрольныеRh-отрицательные). После перемешиваниячашку Петри помещают в водяную баню на10 минут, после чего рассматривают впроходящем свете.

Наличие агглютинации свидетельствуето положительном результате, отсутствиеее – об отрицательном. Для контроля вэтом методе используют заведомоRh-отрицательные и Rh-положительныеэритроциты.

Определение резус-фактора экспресс-методом

В последнее время для определениярезус-принадлежности применяютэкспресс-метод. Реакцию проводят впробирках без подогрева. Для этогонеобходима специальная, универсальнаядля всех групп крови системы АВОсыворотка, приготовленная особымспособом на полиглюкине.

В пробирку помещают 1 каплю сыворотки,добавляют 1 каплю исследуемых эритроцитови после 3-минутного покачивания заливают3-5 мл изотонического раствора хлориданатрия, трижды переворачивают пробиркуи определяют результат в отраженномсвете. Наличие агглютинации свидетельствуето наличии Rh-антигена.

Определение резус-фактора желатиновым экспресс-методом

Широко применяется также желатиновыйэкспресс-метод, основанный на добавлениик крови 1 капли 10 % раствора желатина и10-минутной инкубации пробирок при +37°Си добавлении теплого изотоническогораствора хлорида натрия; производятперемешивание содержимого пробирки.Желатин способствует исчезновениюнеспецифической агглютинации.

На этом же принципе основан методопределения Rh с папаином.

Любой из этих методов может бытьиспользован в экстренных случаях.Независимо от результатов проведенныхисследований и имеющихся данных обидентичности групп крови донора иреципиента перед переливанием кровинеобходимо провести пробы на индивидуальнуюсовместимость.

1. Консервирование, хранение, транспортировка и макроскопическая оценка годности крови

В клинической практике в зависимостиот показаний применяют разнообразныетрансфузионные среды: цельная кровь,свежестабилизированная, консервированная,компоненты крови, кровезаменители идругие.

Цельную кровь переливают непосредственноот донора к реципиенту с помощью аппаратовдля прямого переливания крови.

Для непрямого переливания кровииспользуется свежестабилизированнаяи консервированная кровь.

Консервирование крови – это созданиеусловий для ее хранения в течениедлительного срока в полноценномсостоянии, пригодном для трансфузии.Существуют два практических методахранения крови:

1. в жидком состоянии при температуревыше или ниже 0°С;

2. в замороженном твердом состоянии притемпературе ниже 0°С (вплоть доультранизких, обеспечивающих многолетнеехранение клеток крови).

Кровь, лишенная способности свертываться,называется стабилизированной. Стабилизациякрови в несвернутом (жидком) состояниидостигается связыванием или разрушениемодного из компонентов системы свертываниякрови.

Хорошо изучены и широко применяютсяв практике консервирования кровистабилизаторы, устраняющие ионы кальция.Наиболее приемлемым из большой группыанионов-стаби-лизаторов, связывающихионный кальций, является цитрат натрия.

На его основе приготовлены препаратыЦОЛИПК-7, ЦОЛИПК-76, ЦОЛИПК-12, Глюгицир,Цитроглюкофосфат, Циглюфад и др.

[attention type=red]

Представителем другой группыстабилизаторов, подавляющих действиетромбина, является гепарин. Срок хранениятакой крови – до 24 часов.

[/attention]

При помощи катионообменной смолы можноконсервировать кровь без использованияантикоагулянтов. Для этой цели в системудля взятия крови включается небольшаяампула с катионитом. Кровь донора,протекая через катионообменную смолу,освобождается от кальция и не свертывается.Добавление электролитов, глюкозы исахарозы позволяет хранить катионитнуюкровь в течение 20-25 дней.

В экстренных случаях при отсутствииконсервированной крови можно в условияхоперационной заготовить свежецитратнуюкровь с 4% раствором цитрата натрия. Еепереливают не позднее двух часов послеэксфузии, так как она легко инфицируется.

Заслуживает внимания заготовка кровипри ультранизкой температуре (-196°С).Для консервации эритроцитов кровичеловека применяют два методазамораживания: 1.

очень быстрое охлаждение(250 мл в течение 2 мин до -196°С) и хранениев жидком азоте (при температуре -196°С),не требующее применения большихконцентраций криозащитных веществ; 2.

медленное охлаждение, при которомзамерзание длится несколько часов приумеренно низких температурах (от -25° до-100°С) с применением больших концентрацийкриозащитных веществ (в основномглицерина в составе ограждающихрастворов).

Оба метода позволяют сохранять послеоттаивания неповрежденными 90-97%замораживаемых эритроцитов в зависимостиот применяемых методов. Хранениеэритроцитов в течение 10 лет и более взамороженном состоянии почти не влияетна степень их структурной сохранности,т.е. на биохимические параметры иприживаемость в кровяном русле реципиента.

При консервации крови должны бытьобеспечены: 1. апирогенность консервированнойкрови; 2. отсутствие в ней сгустков игемолиза (безупречная техника пункциивен донора, осторожное покачиваниесосуда во время взятия крови); 3.стерильность (закрытый метод взятиякрови, боксированная операционная,надежная герметизация сосуда сконсервированной кровью).

[attention type=green]

Включение в состав консервирующихрастворов хинина (с концентрацией егов крови 0,02%) удлиняет срок хранения кровидо 45-50 дней. Добавление в консервантантицитолизирующих веществ (дипразин,этизин и др.) позволяет консервироватькровь в течение 60-70 дней. Следует строгособлюдать условия хранения трансфузионныхсред.

[/attention]

Флаконы герметизируют путемпарафинизации горлышка или заливкойспециальной пастой (металлекс): горлышкофлакона 2-3 раза опускают в расплавленныйпарафин, находящийся в водяной бане (tне более 90°С). После парафинизации нагорлышко флакона надевают колпачок извощеной бумаги или марли, которыйукрепляют ниткой или резиновым кольцом.

Если горлышко флакона закрываетсямарлевым колпачком, то проводят повторнуюпарафинизацию.

Пластикатные мешки герметизируютзапаиванием трубки при помощи токоввысокой частоты (аппарат Гематрон) илизавязывают трубки с находящейся в нейкровью узлами на расстоянии 3 и 6 см отмешка и у самой иглы. Конец трубкизавертывают вощаной бумагой илипластикатной пленкой, которую укрепляютнитью. Оставшаяся в трубке кровь вдальнейшем используется для лабораторныханализов.

Консервированная кровь, ее компоненты,препараты (фибриноген, тромбин, альбумини иммуноглобулин), стандартная сывороткаи эритроциты содержат в холодильникахпри температуре 4-8°С.

При наличии большогозапаса крови целесообразно иметьотдельный холодильник для каждой группыкрови. Сухая плазма, препараты из крови,кровезаменители, трансфузионныепластикатные системы хранятся прикомнатной температуре (+15-25°С) в шкафах.

Замороженный криопреципитат игипериммунная плазма хранятся в условияхнизкотемпературной камеры (температура-25°С и ниже).

Холодильники для хранения трансфузионныхсред должны быть снабжены термометрами.Температура в холодильных камерахизмеряется ежедневно 2 раза в сутки ирегистрируется в специальном журнале.

Транспортировка крови: с целью уменьшениямеханической травматизации кровифлаконы должны быть заполнены до горла,помещены вертикально в гнездах специальныхсеток-корзинок, которые затем устанавливаютв термостатистические (изотермические)контейнеры. Контейнеры типа ТКМ-14, ТКМ-7,ТКМ-5, ТКМ-3 (внутри них создают температуруот +4 до +8°С) крепятся в транспорте жестко,а по прибытии на основную базу, флаконысразу же извлекают из гнезд сеток ипомещают в рефрижераторы или холодильныекамеры.

Пластикатные мешки укладывают в картонныекоробки, которые также помещают визотермические контейнеры. Флаконы илимешки с резус-положительной кровьюукладывают отдельно от резус-отрица-тельной.

Непосредственно перед переливаниемкрови для предупреждения развитиятрансфузионных реакций и осложненийврач обязан провести визуальную оценкугодности трансфузионной среды,предназначенной для переливаниябольному, а также проверить герметичностьукупорки сосуда с кровью, наличиеоформленной этикетки с указанием срокагодности и групповой принадлежности,отсутствие в ней сгустков, гемолиза иинфицирования. О дефекте герметичностиможно судить по появлению трещин встекле, нарушению укупорки сосуда,особенно просачивание крови. Кровь доосмотра не должна быть взболтана,необходимо хорошее освещение. Гемолизпроявляется появлением розовой окраскиплазмы и исчезновением четкой границымежду слоем эритроцитов и плазмы, котораяхарактерна для доброкачественной крови.Если кровь взболтана, то следует взять5 мл крови и отцентрифугировать ее.Розовый, а тем более красный цвет плазмыуказывает на гемолиз.

[attention type=yellow]

Выявление в консервированной кровисгустков, особенно массивных, служитоснованием для отказа от ее использования.С целью предупреждения попадания вкровь мельчайших сгустков необходимодля переливания крови использоватьсистему с фильтром.

[/attention]

Инфицирование крови,плазмы точно определяют бактериологическимисследованием, однако массивноебактериальное загрязнение заметно наглаз. Плазма становится мутной, в нейпоявляются взвесь, хлопья, белесоватыепленки на поверхности. Слой эритроцитовпринимает темно-вишневую окраску.

Внекоторых случаях Инфицирование ведетк раннему гемолизу или превращениюкрови в желеобразную массу с неприятнымзапахом и выделением пузырьков газапри проколе пробки.

Таким образом, доброкачественная кровь,находящаяся в ампуле, в покое делитсяна три слоя: на дне – слой эритроцитов;сразу над ним – очень тонкий слойлейкоцитов и сверху – слой прозрачной,слегка желтоватой плазмы.

2. Контрольные исследования припроведении проб на совместимость перед гемотрансфузией.Предупреждение несовместимости передпереливанием.

Причины несовместимости и меры еепредупреждения.

Если реципиенту, в крови которого имеютсяантитела, перелить кровь донора,эритроциты которого содержат антигены,против которых направлены эти антитела,такая кровь будет разрушаться в организмереципиента, т.е. она является для негонесовместимой.

Перед переливанием крови врач долженубедиться в том, что предназначенная,для переливания кровь не содержитантигенов, против которых в кровибольного имеются антитела, т.е. совместимас кровью реципиента.

Для того, чтобы не допустить переливаниянесовместимой крови и следующих за этимклинических проявлений несовместимости,врач переливающий кровь, обязан:

– правильно выбрать кровь в отношениигрупп крови системы АВО;

– правильно выбрать кровь в отношениирезус – принадлежности;

– проверить всю относящуюся к этомудокументацию;

– произвести контрольные исследования,включающие пробы на совместимость.

Врач должен также учесть, что кроменормально существующих антител системыАВО – а и β имеющих большое практическоезначение изоиммунных антител антирезус- D, у реципиента, хотя изначительно реже, могут встретитьсяантитела к другим антигенам эритроцитов:C, E, c, e, Cw, K, Fy, Jk, M, N, S,s и др.

Предупреждение несовместимости поотношению к этим антигенам, так же каки в отношении антигена D должно, в первуюочередь, служить тщательное выявлениепрививочного, трансфузионного иакушерско-гинекологического анамнеза.Кроме того, несовмести­мость к некоторымиз них может быть установлена припроведении проб на совместимость.

Источник: https://studfile.net/preview/2782328/page:7/

Определение группы крови: цоликлоны, стандартные сыворотки и перекрестный способ

Определение резус-фактора крови: как узнать его экспресс-методом

Определение группы крови и резус-фактора делятся на два способа:

Экспресс-диагностика (первичное определение группы крови и Rh-фактора) не учитывает антигены Келл, не говоря уже про другие системы верификации. Поэтому цоликлоны применяют только для первичного определения группы крови и резус-фактора и при экстренных показаниях трансфузии компонентов крови.

Подробнее о самой редкой группе крови в Мире можно найти здесь.

Определение группы крови и резус-фактора цоликлонами анти-А, анти-В и Анти-D супер является наиболее современным и относительно простым методом. Для определения группы крови используются цоликлоны, т.е. моноклональные антитела.

Что требуется для определения группы крови и резус-фактора?

цоликлон анти-А;

цоликлон анти-В;

цоликлон анти-D;

– раствор натрия хлорида 0,9 %; специальный планшет; стерильные палочки.

Методика проведения реакции со стандартными эритроцитами

  1. Кровь для исследования берут из вены в пробирку, центрифугируют или оставляют на 30 мин для получения сыворотки.
  2. На маркированную тарелку наносят три больших капли (0,1 мл) сыворотки крови из пробирки, а рядом с ними по одной маленькой капле (0,01 мл) стандартных эритроцитов групп.
  3. Соответствующие капли смешивают стеклянными палочками, планшет покачивают, наблюдают в течение 5 мин, в капли с агглютинацией добавляют NaCl 0,9% и оценивают результат.

Оценка результатов проведения реакции со стандартными эритроцитами

Оценивают результаты, полученные со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и стандартными эритроцитами. Особенность результатов реакции со стандартными эритроцитами — эритроциты группы 0 (I) считают контрольными.

Результат перекрёстного способа считают достоверным, если при  реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и со стандартными эритроцитами ответы о группе исследуемой крови совпадают.

Если этого не происходит, обе реакции следует переделать.

Источник: https://anest-rean.ru/gruppa-krovi/opredelenie/

Как узнать резус-фактор крови?

Определение резус-фактора крови: как узнать его экспресс-методом

Резус-фактор – один из параметров крови, который отражает присутствие или отсутствие на мембранах красных клеток особого белка Rh. В случае, если он есть, кровь резус-положительная и обозначается Rh+, при его отсутствии резус-отрицательной – Rh-.

Этот белок есть на эритроцитах большинства живущих на планете, но примерно у 15 % его нет. Его отсутствие или присутствие никак не сказывается на здоровье. Rh передается от родителей и на протяжении всей жизни остается неизменным.

Когда сдают анализ на Rh

Еще советуем:Резус-фактор и резус-конфликт

Определение резус-фактора происходит во время анализа крови на группу. Эта информация необходима при переливании, при подготовке к хирургическому вмешательству и в период вынашивания плода.

Во время беременности может произойти конфликт между кровью будущей матери и кровью ребенка. Зная о том, что женщина резус-отрицательная, врачи могут заранее предпринять меры, чтобы избежать конфликта и сохранить здоровье резус-положительного плода.

Сдать кровь на резус можно в лаборатории любой поликлиники или в стационаре. Для исследования делают забор из пальца или из вены.

Как определяют

Методов определения Rh несколько:

  • На чашках Петри методом конглютинации.
  • С помощью цоликлонов.
  • Экспресс-методом в пробирках без подогрева.
  • Желатиновым методом.

Суть анализа заключается в выявлении антигена D с помощью антирезусных сывороток или моноклональных реагентов (цоликлонов) в реакции агглютинации (склеивания эритроцитов и образования хлопьев) в пробирках или на плоскости.

Комплекс препаратов для определения Rh-принадлежности

На чашках Петри

Для определения резус-фактора понадобятся чашки Петри, индивидуальные пипетки, раствор натрия хлорида изотонический, сыворотки стандартные для всех групп крови. Порядок проведения:

  1. Капают рядом по две капли реагента двух серий для трех исследований (в три ряда).
  2. В каждую из серий добавляют по капле исследуемой крови и эритроцитов (контрольных положительных и контрольных отрицательных).
  3. Перемешивают, на десять минут ставят чашку на водяную баню (47°C).
  4. Результат определяют по наличию или отсутствию хлопьев (слипшихся эритроцитов). Если красные клетки склеились, Rh положительный, если слипания не произошло, Rh отрицательный.

Определение Rh-принадлежности цоликлонами

Чтобы узнать резус-фактор, применяют моноклональные реагенты – цоликлоны, которые получают методом генной инженерии из асцитной жидкости мышей. Rh определяется во время реакции агглютинации, которая происходит на плоскости.

Процедура должна проводиться в помещении с хорошим освещением. Для теста берут цельную кровь, эритроциты, находящиеся в сыворотке, плазме, физрастворе или консерванте, или отмытые эритроциты. Для получения лучшего результата нужны эритроциты высокой концентрации, а пластинка, на которой будет происходить реакция, подогревается до 37°C.

Алгоритм действий:

  1. На планшет индивидуальной пипеткой капают большую каплю реагента (примерное количество – 0,1 мл).
  2. Около реагента капают исследуемую кровь (маленькую каплю) или эритроциты в количестве 0,01 мл.
  3. С помощью стеклянной палочки как следует смешивают реагент и кровь и каждые 30 секунд тарелку покачивают в течение трех минут, наблюдая за реакцией визуально.
  4. Реакция агглютинации начинается через 15 секунд, явно выраженной становится через 1 минуту, но результат учитывают только спустя три минуты.

Если началась реакция агглютинации (склеивание эритроцитов и выпадение их в осадок), кровь маркируют резус-положительной, если слипания красных клеток не наблюдается, резус-фактор отрицательный. Склеенные эритроциты, которые представляют собой хлопья, видны невооруженным глазом.

Результат трактуется в зависимости от того, произошла ли агглютинация красных клеток

Экспресс-метод

В качестве реагента применяется сыворотка под названием «антирезус», которая является универсальной для всех групп крови.

  1. В пробирку помещают каплю крови (эритроцитов) в количестве 0,05 мл, затем добавляют 2 капли реагента «антирезус».
  2. Пробирку поворачивают, не встряхивая, чтобы содержимое перемешалось и равномерно растеклось по стеклу.
  3. Примерно через три-пять минут происходит склеивание эритроцитов.
  4. Чтобы исключить агрегацию красных клеток, в пробирку добавляют раствор изотонический NaCl в количестве 2-3 мл и несколько раз переворачивают пробирку, чтобы содержимое перемешалось.
  5. После этого считывают результат. Если появились хлопья на фоне более светлой жидкости, Rh положительный, если хлопьев нет, жидкость окрашена равномерно в розовый цвет, Rh – отрицательный.

Нужно сказать, что универсальные сыворотки могут дать ложноположительную реакцию с Rh-отрицательными эритроцитами.

Может произойти неспецифичное склеивание красных клеток, на поверхности которых есть другие антитела – не атирезус. Поэтому параллельно проводят тестирование с контрольным раствором усилителя.

Если после введения контрольного раствора происходит агглютинация, результат считается недостоверным, и тестирование повторяют с другим реагентом.

Пробирочный метод определения Rh

С применением желатина

Эта методика основана на применении желатина (в виде раствора 10 %). Для тестирования используются и стандартные антирезусные реагенты, и цоликлоны.

  1. В пробирку капают одну каплю крови (0,05 мл) или эритроцитов в виде взвеси в сыворотке (50 %).
  2. Затем 2 капли подогретого заранее до жидкого состояния раствора желатина.
  3. Далее 2 капли реагента, затем смешивают.
  4. Пробирку ставят на пять-десять минут на водяную баню (47°C) или на полчаса в сухой термостат с такой же температурой.
  5. Затем в пробирку добавляют физиологический раствор (5-8 мл), закрывают крышкой и осторожно поворачивают два-три раза, чтобы перемешать.
  6. Для определения наличия хлопьев содержимое пробирки осматривают невооруженным глазом на свет или через увеличительное стекло.

При использовании желатина не происходит неспецифической агглютинации. После проведения такой пробы необходимы контрольные тесты:

  • со стандартными Rh+ эритроцитами;
  • со стандартными Rh- эритроцитами;
  • с исследуемой кровью (эритроцитами) и желатином.

Заключение

Информация о резус-факторе необходима в случае переливания крови. Для гемотрансфузии может быть использована только совместимая по группе и по резусу кровь. Кроме этого, следует определить резус-фактор во время беременности. Еще лучше узнать его на этапе ее планирования. Это необходимо, чтобы предотвратить резус-конфликт между Rh-положительным плодом и Rh-отрицательной женщиной.

Источник: https://icvtormet.ru/krov/kak-uznat-rezus-faktor

Определение резус фактора крови: алгоритм как определить, таблица

Определение резус-фактора крови: как узнать его экспресс-методом

Наблюдение врачей на протяжении многих лет показывают, что белок Rh на организм и его здоровье оказывает определенное влияние, придавая отдельные дополнительные свойства. Иначе говоря, люди с отрицательным резусом физиологически несколько отличаются от тех, у кого этот параметр положительный. Он передается от родителей и не меняется всю жизнь.

Что такое резус фактор

Это показатель крови, отражающий присутствие либо отсутствие красных клеток белка Rh. Он имеется в эритроцитах в основном у всех людей. Однако приблизительно у 15% этого особого белка нет. Показатель совершенно не влияет на качество либо количество биологического материала – кровь.

Больному с отрицательным резусом можно переливать кровь только с таким же резусом. В противном случае при попадании положительного белка, начинается выработка антител, здоровье человека будет в опасности. А переливать больному с положительным резусом кровь с отрицательным резусом допускается.

Если у отца Rh «+», матери Rh «–», а у плода резус как у папы, кровь беременной мамы воспринимает плод как инородное тело. В результате резус конфликта, здоровью малыша грозят серьезные проблемы. Может случиться даже выкидыш.

[attention type=red]

В разрешении данной ситуации современная медицина продвинулась далеко. Если резусы не совпадают, беременная должна сдавать кровь каждый месяц. Это позволит узнать наличие антител. При их обнаружении будет назначена специальная терапия.

[/attention]

Для определения резус фактора крови проводят определенные исследования.

Особенности подготовки

Процедура не отличается от забора биологического материала для проведения общего анализа. Медсестра набирает в пробирку небольшое количество крови из вены, после этого ее запечатывают и маркируют. При взятии образца пациент почти не ощущает боли. На процедуру уходит несколько минут. Перед исследованием не нужно соблюдать строгий режим, однако есть некоторые исключения.

Внимание!

Сдавать кровь можно после того, как пройдет 4 часа после употребления пищи.

Если человек принимает лекарственные препараты, необходимо сообщить врачу. Есть медикаменты, которые влияют на результат.

Способы определения

Существуют лабораторные и клинические методы. Они различаются совершенствованием, наличием оборудования, специально предназначенного для этих целей, и временем, за которое необходимо сделать исследование. Для определения резус фактора могут использовать разные способы:

  • при помощи цоликлонов;
  • экспресс-метод в пробирках без подогрева;
  • на чашках Петри;
  • с помощью желатина.

Почти все современные лабораторные тесты дают 100%-нвй результат. На достоверность могут повлиять несоответствующие условия, в которых проводится процедура.

А именно если в неисправном состоянии будет термостат либо в то место, где происходит химическое взаимодействие, попадут посторонние химические реагенты.

От квалификации лаборанта, выполняющего процедуру, и чистоты лаборатории зависит точность исследования.

Чашки Петри

Для того чтобы определить резус данным способом, потребуются:

  • чашки Петри;
  • изотонический раствор натрия хлорида;
  • пипетки;
  • стандартные сыворотки для каждой группы крови.

Лаборант капает в 3 ряда рядом по 2 капли реагента 2-х серий, в каждую добавляет каплю крови, взятую для исследования, а также контрольные отрицательные и положительные эритроциты. Осторожно смешивает, и отправляет на водяную баню на 10 минут.

Результат зависит от того, есть или нет хлопьев, которые создают слипшиеся эритроциты. Если склеивания не случилось, то определяемый биоматериал имеет отрицательный резус, при произошедшем слипании можно говорить о положительном факторе Rh.

Цоликлоны

Узнать резус можно, используя цоликлоны, которые относятся к моноклональным реагентам.

Определение происходит в процессе реакции агглютинации, когда в присутствии электролита под воздействием антител склеиваются и выпадают в осадок различные клетки, в том числе и эритроциты. Процедуру выполняют в хорошо освещенной комнате.

Для того, чтобы провести тест понадобится цельная кровь, отмытые эритроциты либо те, которые присутствуют в консерванте, плазме, сыворотке.

Более достоверный результат можно получить, используя эритроциты высокой концентрации. Для реакции берут пластину, подогретую до 37 градусов. На нее капают с помощью пипетки примерно 0,1 мл реагента, рядом с ним 0,01 мл. эритроцитов либо крови.

Стеклянной палочкой эти 2 компонента аккуратно перемешивают, покачивая каждые полминуты тарелку, лаборант зрительно наблюдает за реакцией. Она начинается спустя четверть часа, в активную фазу входит через минуту, однако результат принимают в расчет лишь через 3 минуты.

Если эритроциты не выпадают в осадок – резус отрицательный, склеивание и выпадение красных клеток в виде хлопьев свидетельствует о положительном резусе. Реакция видна невооруженным глазом.

Желатин

Чтобы определить резус-фактор, нередко прибегают к использованию желатинового экспресс-метода.

При процедуре к крови добавляют 10 % раствор желатина в количестве 1 капли, пробирку помещают на 10 минут в благоприятные условия с температурой в 37 градусов, добавляют теплый изотонический раствор хлорида натрия. Содержимое осторожно перемешивают.

Желатин относится к веществам, которые помогают исчезновению неспецифической реакции эритроцитов. В экстренных ситуациях можно применять любой из методов определения резус фактора.

Внимание! [attention type=green]

Перед переливанием крови обязательно должны быть проведены пробы на совместимость.

[/attention]

Процедуру выполняют даже, если имеются данные о том, что группы крови больного и донора идентичны.

Расшифровка результатов

Взятие анализа по определению резуса занимает мало времени, выполняется довольно быстро. Его результат указывают на первом листе истории болезни, у доноров данные могут быть внесены в паспорт.

Если положительный Rh не требует внимательного отношения, то с отрицательным надо быть более внимательным. При попадании в больницу для проведения операции либо при необходимости переливать кровь, обязательно надо сообщать о нем врачу.

В основном перед хирургическим вмешательством медики проводят контрольный анализ, при не совпадении с имеющимися результатами, его проводят еще раз.

Каждый человек должен знать свою группу крови и резус-фактор, поскольку может пригодиться в любой момент. Особенно это касается женщин, которые планируют родить ребенка. Отсутствие резус-фактора – это не заболевание.

Его учитывают лишь в период беременности у женщин с отрицательным Rh. Современная медицина помогает вовремя определить резус, чтобы ребенок родился здоровым и без патологии.

Для получения правильного и достоверного результата следует обращаться в хорошую лабораторию, которая работает согласно надлежащим требованиям.

Источник: https://sosud-ok.ru/krov/analiz/opredelenie-rezus-faktora-krovi.html

Умный врач
Добавить комментарий

;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!: